透过专利信息跟踪农业生物技术最新研究成果——年第26周篇

作者：莱肯生物

很多技术和产品的创新由于各种原因无法或暂时无法发表研究论文（高影响因子论文和高价值专利评判标准的不同、保持新颖性的需要、保密技术细节的需要等），因此公开的专利信息就是跟踪最新技术和产品的重要渠道。

然而，中国的专利年申请量已接近万件，如何从浩如烟海的专利资料中找寻到有价值的信息是一项具有挑战的工作。

本专栏将定期梳理最新公开的农业生物技术领域的发明专利，并就部分专利进行简单介绍，以为相关从业者提供有价值的信息参考。

今天让我们看看年第26周都公开了哪些农业生物技术相关的专利。

年第26周公开的

部分农业生物技术专利简介

关键词：抗除草剂蛋白、玉米耐冷基因、油菜高抗裂角位点、玫瑰花香基因

1、抗虫抗除草剂

巴斯夫欧洲公司申请的专利6（发明人：黄华章;?A·C·梅农）涉及一种防治马铃薯植物的害虫的方法。本发明发现式(I)化合物与其他农业活性成分如杀虫剂或杀真菌剂或杀线虫剂的混合物尤其适于防治和/或防除无脊椎害虫的方法。

中国农业大学申请的专利837858（发明人：简恒;?孙许谦;?闫世艳;?刘倩）涉及象耳豆根结线虫MSP19蛋白及其编码基因以及它们作为靶标在抑制线虫中的应用。

本发明通过原位杂交技术，发现MSP19基因在线虫食道腺部位特异表达，表明MSP19为食道腺体特异表达的蛋白，并且会分泌到细胞外发挥作用。亚细胞定位实验模拟MSP19在植物细胞发挥作用的部位，实验发现烟草的整个细胞都有表达，表明其可能分泌到植物细胞后在整个细胞发挥作用。实时荧光定量PCR检测了MSP19虫态发育表达模式，发现此基因在线虫寄生植物后的虫态时期，基因表达量会维持在较高水平，表明MSP19可能参与了线虫寄生以及巨大细胞维持。MSP19超表达拟南芥株系对线虫的敏感性显著升高，相反拟南芥介导的RNAi干扰株系对线虫的敏感性显著降低，表明MSP19是线虫致病过程中的一个关键基因。同时对MSP19基因功能初步探究发现，在烟草叶片上瞬时表达该蛋白其可以抑制由BAX引起的免疫坏死反应，且可以抑制由线虫侵染植物根部引起的活性氧的爆发，表明该基因具有抑制植物的免疫反应的功能。

科稷达隆生物技术有限公司申请的专利3（发明人：李雪峰;?罗祖勇;?王明;?李莹莹;?李相敢;?黎跃进）和8（发明人：李雪峰;?罗祖勇;?张李;?王明;?李莹莹;?李相敢;?黎跃进）涉及一组抗除草剂蛋白及其在植物育种中的应用。

本发明通过化学诱变的方法在高粱突变植株中发现了一系列具有除草剂抗性的突变蛋白。本发明提供使植物具有除草剂抗性的ALS蛋白质，与野生型相比，带有在位点从P到L的氨基酸突变和/或在位点从S到N的氨基酸突变。还提供了使植物具有除草剂抗性的ACCase蛋白质，其与野生型相比，带有在位点从A到V的氨基酸突变。

2、玉米

中国农业大学申请的专利2（发明人：杨淑华;?施怡婷;?李卓洋）、0（发明人：杨淑华;?施怡婷;?张晓燕）、7（发明人：施怡婷;?杨淑华;?张晓燕）和X（发明人：杨淑华;?蒋海芳;?施怡婷）分别涉及玉米耐低温蛋白ZmbZIP68、ZmCIPK10.1、ZmCIPK10.2和ZmICE1。

玉米ZmbZIP68基因能够负调控植物抗寒性，通过降低ZmbZIP68基因的表达量，能够有效提高植物的抗寒性，利用CRISPR/Cas9技术获得了具有优异抗寒性能的ZmbZIP68基因纯合敲除玉米株系。

ZmCIPK10.1基因、ZmCIPK10.2和ZmICE1能够正调控玉米抗寒性，在玉米中过表达ZmCIPK10.1或ZmCIPK10.2或ZmICE1，可增强转基因玉米的耐低温能力。

北京科技大学、北京中智生物农业国际研究院和北京首佳利华科技有限公司申请的专利721461（发明人：万向元;?颜廷玮;?安学丽;?江易林;?刘欣泽;?朱涛涛;?李紫文;?董振营;?吴锁伟;?李金萍）公开了雄性不育基因ZmMYB84及其在创制玉米雄性不育系中的应用。本发明通过CRISPR/Cas9基因编辑技术在野生型玉米中定点突变该基因，可以导致完全的雄性不育，发现了ZmMYB84基因对玉米雄性生殖发育的调控功能。通过后代筛选，可以得到不含转基因成分的不育系，创制出稳定的玉米雄性不育系。本发明还针对获得的myb84雄性不育突变体设计了功能分子标记。

华中农业大学申请的专利103926030（发明人：张祖新;?简逸楠;?宁强）涉及玉米基因ZmEREB在提高玉米产量中的应用。该基因位于玉米第7染色体，控制玉米穗长、每行籽粒数和每穗籽粒数。在近等基因系之间和自然群体中该基因的表达水平与穗长和每行籽粒数负相关。利用CRISPR/Cas9技术敲除该基因、抑制基因表达，能增加干旱胁迫和正常环境下玉米自交系的穗长和每行籽粒数。

中国农业大学申请的专利3（发明人：周涛;?刘学东;?刘思佳;?陈曦;?范在丰）提供了一种抗玉米病毒的小RNA。本发明的小RNA为玉米miR。本发明发现在玉米中沉默miR后接种玉米褪绿斑驳病毒MCMV，可以明显增强病毒侵染引起的花叶症状，且MCMV积累水平明显提高；还发现在玉米原生质体中沉默miR导致MCMV积累增加，而过表达miR的玉米原生质体中MCMV积累减少，表明miR在玉米中发挥抗MCMV作用。本发明表明miR可用于培育抗MCMV的玉米品种。

中国农业科学院生物技术研究所申请的专利103564307（发明人：徐妙云;?王磊;?朱明;?靳礼安;?邢利娟）公开了一种玉米耐盐性相关的ZmNF?YA8基因SNP标记及其应用。所述SNP位点位于ZmNF?YA8基因的3’UTR下游bp处，存在两种等位变异：CC和TT基因型；与CC基因型相比，含有TT基因型的玉米自交系苗期耐盐性显著增强。

3、调控元件

上海药明生物技术有限公司申请的专利5（发明人：张峥;?李晓璐;?张玉琛;?李雅蓉;?董慧芳;?蔡洁行;?周伟昌;?陈智胜;?牟丽丽;?汤传龙）涉及一种转录调节元件及其在增强异源蛋白表达中的应用。

由于单克隆抗体，例如阿达木单抗、PD1的单克隆抗体和PDL1的单克隆抗体，均可以通过哺乳动物表达系统进行生产，而哺乳动物表达系统存在异源蛋白表达水平较低的问题，因此，迫切需要对现有技术已知的哺乳动物表达系统进行改进，提供一个能够达到显著更高水平的异源蛋白表达的系统。与此同时，需要通过上述系统，生产人源化单克隆抗体。本公开提供了一种源于CHO（ChineseHamsterOvary）细胞的，可以用于增强异源蛋白表达的DNA序列，所述DNA序列能够用于增强哺乳动物表达系统的异源蛋白表达水平。使用WXRE转录调控元件可以在保持其生物活性不变的情况下大幅提高异源蛋白的表达水平。

河南农业大学申请的专利126324（发明人：张洪映;?崔红;?王召军;?闫筱筱）公开了一种植物花器官优势表达基因JAZ?10、其表达产物、表达载体及应用，旨在促进当前雄性不育、种子败育植物品种的构建或筛选等技术的深入发展。

本发明基于对烟草JAZ家族成员的研究，鉴定出一个可以调控植物雄性不育的花器官优势表达基因JAZ10（JasmonateZIMdomain-10），具有典型的ZIM和Jas保守结构域。本发明构建了其过表达载体和CRISPR/Cas9载体，并分别转化获得对应过表达株系和基因敲除植株；经花器官的显微观察表明，JAZ?10能够调控植物子房心皮、雄蕊和柱头毛的发育，其在分子育种、杂交育种、杂种优势、种子败育植物品种的构建或筛选等方面具有重要的应用价值。

中国热带农业科学院橡胶研究所申请的专利104310952（发明人：黄天带;?辛士超;?吉努乌达亚巴努;?华玉伟;?戴雪梅;?杨先锋;?黄华孙）涉及一种橡胶树泛素基因的启动子proHbUBI2及其克隆方法及应用。本发明通过核苷酸序列比对在巴西橡胶树基因组中筛选得到高度保守的橡胶树泛素基因，并进一步通过克隆HbUBI2基因起始密码子ATG上游启动子，首次在巴西橡胶树中获得橡胶树泛素基因启动子proHbUBI2，该启动子为橡胶树内源组成型启动子，在橡胶树不同发育时期的多个组织中均具有高效转录活性，可用于驱动外源基因的表达。

华中农业大学申请的专利528638（发明人：王幼宁;?黄慧梅;?王小迪;?李霞）公开了一种用于干扰目的基因表达的方法。本发明首次采用STTM技术来干扰目的基因的mRNA，使其表达水平下调，以达到干扰目的基因的目的。

STTM（ShortTandemTargetMimic，短串联靶模拟）是一类针对内源小RNA降解或失活的工具，是一段根据miRNA的核酸序列人工设计相对应的互补寡聚核苷酸链，由一段48nt或88nt的间隔序列将两个miRNA靶位点序列连接起来。STTM能够特异识别并降解miRNA，此外，研究发现STTM对靶标miRNA和siRNA的降解部分依赖于小RNA降解核酸酶（smalldegradingnucleases，SDNs）。STTM技术能够有效破坏内源性小RNA，为植物小RNA分子的功能基因组学研究提供了强有力的工具。本发明通过利用STTM技术使得大豆GmNRT1.5基因的表达水平下调，导致大豆转基因毛状根侧根数目增多，根系总表面积增加。

4、油菜

中国农业科学院油料作物研究所申请的专利103694052（发明人：储文;?胡琼;?成洪涛;?付丽;?刘佳;?王会;?汪文祥;?李超;?梅德圣;?郝梦宇）涉及油菜高抗裂角位点qSRIchrC9及其分子标记和应用。该位点位于油菜C9染色体上，高抗裂角性状受一对隐性单基因控制。本发明公开三个与该高抗位点紧密连锁的分子标记S10、S13和S15。本发明中的位点和标记可应用于油菜育种中抗裂角品种的选育。

西南大学申请的专利105181（发明人：王珍;?梁颖;?王晓改;?王淑文;?李加纳）公开了甘蓝型油菜BnMAPK1基因在提高植物耐荫性中的应用及方法，受弱光胁迫下，BnMAPK1通过正向调控植物光合作用中的叶绿素含量、净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率光合参数，同时活化PSⅡ光化学反应中心，提高甘蓝型油菜耐荫性；分子机理研究表明，BnMAPK1通过光合作用?天线蛋白途径对光系统Ⅱ复合体LHCB基因发挥调控作用，BnMAPK1通过负调控光系统Ⅱ中LHCB1.3、LHCB3和LHCB4.2基因的表达，进而正向调控甘蓝型油菜耐荫性，为MAPKs级联的功能研究提供了参考资料，同时为耐荫性分子标记的开发及其优良品种的选育奠定了理论基础。

河南大学申请的专利103618383（发明人：王道杰;?杨翠玲;?王勇锋;?赵恬;?丁群英;?剧凌岳）涉及一种与油菜抗旱性相关的基因、过表达载体、细胞系、宿主菌及其应用。本发明的BnWRKY基因在抗旱上起负调控作用，并降低了过表达植株对ABA的敏感性，为深入了解油菜WRKY参与的抗逆信号网络提供参考依据和相关基因。

中国农业科学院油料作物研究所申请的专利10353473X（发明人：华玮;?李俊;?刘婧琳;?范世航）公开了一种潮霉素抗性高效油菜遗传转化的方法，其步骤是：A.油菜种子的灭菌及播种；B.以农杆菌介导，将携带潮霉素筛选标记的目的载体转入油菜下胚轴；C.愈伤筛选过程中固体筛选培养基培养21天后，转入相同成分液体筛选培养基培养3天，以保证对转化后的愈伤有最佳的筛选强度和分化效果，并继代培养；D.待分化出转基因苗，提取转基因苗DNA，进行PCR阳性检测。本发明在愈伤筛选过程中加入液体培养基筛选方法，在缩短油菜转基因周期的同时，大幅度提高了转基因出苗率和阳性率，从而有效提高了潮霉素抗性油菜的遗传转化效率。

5、其他

中国科学院微生物研究所申请的专利4（发明人：邱金龙;?张倩伟;?尹康权）涉及改进的基因组编辑系统及其应用。更具体而言，本发明提供一种基因组编辑融合多肽，其包含CRISPR核酸酶和5’→3’核酸外切酶。本发明还提供编码所述多肽的多核苷酸或表达构建体，以及包含所述多肽、多核苷酸和/或构建体的基因组编辑系统。本发明还提供用所述基因组编辑系统编辑细胞基因组的方法。

浙江大学申请的专利717447（发明人：陈昆松;?石艳娜;?苏冠清）提供LOB1基因编辑方法及在制备耐储运易后熟番茄中的应用。本发明通过对SlLOB1基因编辑，实现了番茄果实质地的改变，果实密度变小可直接浮在水面，果肉组织保持完整，而对照果实沉在水底，并果肉组织完全崩溃成水状。本发明的应用克服了目前产业上为了减少采后损耗，番茄果实提早采收，货架前再催熟，导致果实的风味和营养物质积累不足的缺陷。通过敲除SlLOB1转录因子改变果实质地，使得成熟果实保持高硬度，可正常成熟保证了果实的风味和营养价值。该发明提供了制备耐储运易后熟的番茄的新方法，具有应用前景。

扬州大学申请的专利103179032（发明人：冯立国;?邢永祥;?王建文;?徐勇;?鲍明月）涉及一种玫瑰花香调控基因RrTPS1及其应用。本发明通过实时荧光定量检测技术，检测RrTPS1基因在不同花期和花器官不同部位的表达模式，同时通过构建过表达载体转化矮牵牛，证明其促进芳香物质合成，在增强花香物质合成、改良精油品品质和产量等花卉育种领域有重要应用价值。

山东省果树研究所申请的专利101971718和10197717X（发明人：陈新;?许海峰;?王贵芳;?相昆;?张美勇;?刘庆忠;?徐颖）分别涉及一种花青苷调控蛋白JrMYB和JrMYB10及其编码基因和应用。本发明的JrMYB和JrMYB10蛋白及其功能，可用于培育花青苷含量改变的转基因植物，在植物育种中具有重大应用前景。

武汉隽秀园艺科技有限公司;?唐山师范学院申请的专利710683（发明人：包颖;?俞斌;?陈宇晴;?陈文静）公开了一种以愈伤为受体获得满天星转基因植株的方法，以满天星茎段诱导得到的愈伤组织为遗传转化受体，通过农杆菌介导的方法，经愈伤组织诱导、转化受体的继代增殖培养、遗传转化，共培养，选择增殖培养、选择萌发培养、选择成苗培养并最终得到满天星的转基因植株。本发明方法简单，培养周期较短，成功实现满天星转基因植株的培育。

结案专利详察——

岭南师范学院申请的专利《一种栽培稻种间杂种不育基因S1及其应用9》（发明人：马生健）经过实质审查后于年2月5日被驳回。申请人于年5月18日请求复审，合议组经过审查，认为权利要求请求保护的技术方案不具备创造性，因此最终于年4月23日做出了维持原驳回决定的审查决定。今天，就让我们详细看看这个专利。

1、发明内容

本发明公开了一种栽培稻种间杂种不育基因S1及其应用。所述S1基因包括两个等位基因S1-j和S1-g。本发明通过图位克隆的方法，首先开发出了适合S1基因定位的多个分子标记，构建出了适合定位的超大定位群体，对栽培稻种间杂种不育基因S1进行了定位克隆，获得了候选基因ORF12，并进一步测定了杂种双亲S1等位基因各自的全长序列，发现杂种双亲的S1基因即表现出了等位相似性又表现出杂种不育性状原有的差异性。本发明的S1基因为国内首个克隆到的水稻的种间杂种不育基因，将为解决水稻种间杂种雌雄不育问题，指导水稻育种，进一步提高水稻产量提供坚实的理论基础。

2、驳回决定

国家知识产权局原审查部门经实质审查于年2月5日以权利要求1-7不具备创造性为由驳回了本发明专利申请。驳回决定所针对的权利要求书如下：

“1.一种栽培稻种间杂种不育基因S1，其特征在于，该S1基因包括两个等位基因S1-j和S1-g；S1-j的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，S1-g的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述不育基因S1的定位和克隆方法包括如下步骤：

S1.近等基因系的获得与定位群体的构建

将近等基因系IRATS1-1，IRATS1-2，IRATS1-3与轮回亲本IRAT回交后自交各得到两个BC9F2分离群体，依次编号为，；，；，；

S2.S1基因初步定位与精细定位的分子标记的开发

根据